Hur kan jag isolera bakterier från jord

? Marken är en rik källa till många olika typer av bakterier . Bakterier hjälper i ruttnande växt -och djurdelar , vid fastställandet oorganiska element och att samverka med växternas rötter och jordpartiklar . Även i ett litet jordprov , som den som finns i en matsked , det finns miljontals olika bakterier . Uppgiften att isolera enskilda bakterier är att späda ut den jordprov för att få den bakteriella koncentrationen är tillräckligt låg för att en enda bakterie kan separeras från andra och kan växa till en ren koloni på näringsagar . Detta är vad du behöver
tryptikassojabuljong
5 ml provrör , steriliserade och utjämnade
Sterila trä Popsicle pinnar
Wax märkning penna
provrörsställ
Hushållspapper
Bleach ( 10 procent lösning ) katalog bunsenbrännare
Matchar
Ympning slinga
Trypticase sojaagar
Petri plattor
Incubator
Kylskåp
Visa fler Instruktioner
jordprov
ett provrör som används för spädning av jordprover .

avsätta en korkade sterilt provrör containg 5 ml närings tryptikassojabuljong . Välj en steril Popsicle pinne .
2 Använd en steril Popsicle pinne att samla jord .

Gå ut och samla en liten jordprov med spetsen på Popsicle pinne , med steril teknik , en metod för att säkerställa att provet inte är förorenad , och att användaren inte är smittad . Addera 3

Ta bort skyddet från provröret och tillsätt i marken till näringsbuljongeni provröret . Blanda jorden i buljong med Popsicle pinne . Täck provröret med lock. Skriv insamling datum och uppsamling läge på sidan av provröret med användning av vaxet markeringspenna .
4

Placera provröret i ett provrörsställ under ca 30 minuter för att tillåta jorden att sedimentera till botten .
Inokulera Petri Dish
5

Desinficera arbetsytan genom att rengöra den med 10 procent blekmedel och pappershanddukar .
6

Vrid petriskål så att den nedre locket som innehåller agar är upp . Rita en T på den nedre lock, med tvärbalken hos T utskiljning av den övre tredjedelen av locket och skaftet av T dividera de nedre två tredjedelar till hälften.
7 Använd en bunsenbrännare för att flamma ympa slingor .

Slå på och tända bunsenbrännare . Flame ympning slinga över bunsenbrännarens låga .
8

Uncap provröret och tryck på slingan till det övre skiktet av tydligare vätska . Dra slingan och åter täcka provröret .
T - Streak Metod
9 Gör en sicksack strimma över en tredjedel av skålen .

Använd ribban av T du ritade på baksidan av bottenlocketsom referenspunkt . Rör vid inokulering slinga på ena sidan av utrymmet ovanför T- ribban och drar spetsen över ytan av agar i en sicksacklinje, som slutar linjen på motsatt sida av utrymmet .
10

avlägsna inokulering loop och stäng petriskål . Flamma slingan i bunsenbrännare , och låt den svalna en kort stund . Öppna petriskål och röra slingan till en plats nära slutet av raden redan teckningar av slingan . Gör en annan sicksacklinje i rät vinkel mot den första raden , som täcker det första utrymmet under T ribban och till en sida av skaftet .
11

Avlägsna slinga och stäng petriskål. Flamma slingan igen , öppna petriskål , och peka på något kylda slingan till den andra linjen nära sitt slut . Rita en annan sicksacklinje i rät vinkel till den andra raden i den återstående öppna utrymmet på petriskål.
12

Stäng petriskålen efter återkalla slingan. Flamma slingan och ställ den åt sidan . Stäng av bunsenbrännare .
Sekundär Kultur
13 Välj en koloni för att ytterligare isolera bakterier .

Placera petriskålen i en inkubator vid 30 ° C under 48 timmar. Ta ut den och undersöka agar för tillväxten av bakteriekolonier. Välj en koloni som ser jämn och diskret i allmänna utseende , en indikation på att kolonin uppstod från bara en enda bakterie . Circle platsen av kolonin på baksidan av det undre locket med märkpenna.
14

Flame den inokulering slinga. Öppna den petriskål och rör vid något kylda slingan till mitten av kolonin .
15

Upprepa stegen för att göra en T - strimma på en ny petriplattamed agar i bottenlocket. När strimma görs och petriskålen är stängd , skriver datumet och jordprovet ympen togs ur på undersidan av bottenlocket. Stäng av bunsenbrännare .
16

Inkubera petriplatta vid 30 ° C under 48 timmar. Undersök de kolonier som vuxit på agar , letar efter enhetlighet i färg , form och textur. Upprepa den sekundära kulturen förfarandet om det finns några kolonier som avviker markant i utseende från de andra , vilket tyder på att en enda bakterie som inte isolerades .
17 Identiska utseende kolonier indikerar bakteriell isolering .

Kylskåp agarplattan som innehåller identiska -framträdande kolonier på den , med den likformighet vara en god indikation på att bara en enda bakterie har isolerats från jordprovet .
18

utföra andra tester för identifiering av den isolerade bakterien , om så önskas , till exempel gram fläckar , mikroskopisk undersökning och kultur på olika typer av agar . Addera